縱觀歷史,幾乎沒(méi)有哪一門(mén)科學(xué)技術(shù)像流式細(xì)胞術(shù)這樣凝結(jié)了眾多不同學(xué)術(shù)背景、不同科研領(lǐng)域科學(xué)家的心血。從流式細(xì)胞術(shù)的發(fā)明、改進(jìn)和革新,到今天在各個(gè)領(lǐng)域應(yīng)用的拓展,每一步都是諸如生物學(xué)、生物技術(shù)、計(jì)算機(jī)科學(xué)、流體...[繼續(xù)閱讀]

    FCM的結(jié)構(gòu)一般分為5部分:①流動(dòng)室及液流驅(qū)動(dòng)系統(tǒng);②激光光源及光束成形系統(tǒng);③光學(xué)系統(tǒng);④信號(hào)檢測(cè)、存貯、顯示、分析系統(tǒng);⑤細(xì)胞分選系統(tǒng)。流式細(xì)胞儀的結(jié)構(gòu)見(jiàn)圖1-2-4。圖1-2-4流式細(xì)胞儀的光路結(jié)構(gòu)圖(一)流動(dòng)室與液流驅(qū)動(dòng)系...[繼續(xù)閱讀]

    (一)熒光測(cè)量靈敏度靈敏度的高低是衡量?jī)x器檢測(cè)微弱熒光信號(hào)的重要指標(biāo),一般以能檢測(cè)到單個(gè)微球上最少標(biāo)有FITC或PE熒光分子數(shù)目來(lái)表示,一般現(xiàn)在的FCM均可達(dá)到600個(gè)熒光分子。(二)儀器的分辨率分辨率是衡量?jī)x器測(cè)量精度的指標(biāo)...[繼續(xù)閱讀]

    眾所周知,流式細(xì)胞儀是通過(guò)內(nèi)置的激光器發(fā)射的激光激發(fā)熒光染料,通過(guò)熒光將488nm或其他波長(zhǎng)的光轉(zhuǎn)變?yōu)榱硪徊ㄩL(zhǎng)的光;并通過(guò)光電倍增管將光信號(hào)轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘?hào),并由計(jì)算機(jī)統(tǒng)計(jì)處理變?yōu)榭勺x數(shù)據(jù)。在流式細(xì)胞儀上常用的熒光素有...[繼續(xù)閱讀]

    FCM對(duì)單細(xì)胞快速進(jìn)行各種參數(shù)分析必須以單細(xì)胞為基礎(chǔ),根據(jù)各種組織成分的特點(diǎn)可選擇不同的分散細(xì)胞方法,以期達(dá)到單細(xì)胞產(chǎn)額高、損傷少的目的。盡管標(biāo)本制備已形成了標(biāo)準(zhǔn)化的程序,但實(shí)際操作中總會(huì)出現(xiàn)這樣或那樣的問(wèn)題。...[繼續(xù)閱讀]

    正常組織、瘤組織和淋巴結(jié)等活檢組織以及內(nèi)鏡(胃鏡、食管鏡等)取材標(biāo)本,由于材料較少,制備起來(lái)比較麻煩。但其制備方法與實(shí)體組織基本相似;(1)取材后立即放入盛少許PBS液的青霉素小瓶中;(2)另取一只小燒杯,杯口用300目尼龍網(wǎng)蓋...[繼續(xù)閱讀]

    石蠟包埋組織單細(xì)胞分散方法的建立,擴(kuò)大了流式細(xì)胞術(shù)的應(yīng)用范圍。對(duì)大量臨床隨訪資料通過(guò)病理包埋組織的流式細(xì)胞術(shù)分析,可以重新得到深入研究和利用。現(xiàn)將常用的制備石蠟包埋組織單細(xì)胞方法介紹如下。(一)實(shí)驗(yàn)方法(1)把石...[繼續(xù)閱讀]

    血液是天然的單個(gè)細(xì)胞分散的細(xì)胞懸液,血細(xì)胞在生理狀態(tài)下呈分散的游離狀態(tài)。它是流式細(xì)胞分析的理想樣品。血液中的主要細(xì)胞成分為白細(xì)胞、紅細(xì)胞和血小板;而其中白細(xì)胞主要成分又分為淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞和粒細(xì)胞。但在血...[繼續(xù)閱讀]

    (一)制備方法(1)無(wú)菌抽取骨髓液0.5ml;(2)將骨髓標(biāo)本滴入含1000U/ml肝素抗凝劑的1mlPBS液中;(3)再加入PBS液稀釋至10ml;(4)用吸管吸取5ml稀釋骨髓液徐徐加入盛有4ml的人類淋巴細(xì)胞分離液液面之上;(5)在以上條件下,骨髓有核細(xì)胞分層在PBS-人類...[繼續(xù)閱讀]

    (一)培養(yǎng)細(xì)胞的特征一般細(xì)胞培養(yǎng)分為懸浮培養(yǎng)和貼壁培養(yǎng),由于細(xì)胞的增殖有可能形成大小不等的細(xì)胞團(tuán)塊或連接成片。如果兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞粘連在一塊或細(xì)胞碎片過(guò)多都將影響FCM結(jié)果,進(jìn)而導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗。所以,制備合格的培養(yǎng)細(xì)胞...[繼續(xù)閱讀]