DNA/RNA染料在FL1中檢測,用來識別所有有核細胞,在流式細胞儀分析時作為圈定白細胞的基礎。采用標準ISHAGE方法進行CD34-PE/CD45-PC5+染色分析,絕對定量微球BD機器在FL4通道內檢測,Coulter機器可在FL3通道內檢測。(一)樣本準備(1)驗證移液器...[繼續(xù)閱讀]

    在CD34計數(shù)檢測中有眾多因素影響著計數(shù)的準確性。這些因素可通過以下操作步驟來去除這些影響:①盡量減少對樣本處理步驟;②使用適當標記的抗體;③選擇適當?shù)年幮院完栃詫φ諛吮?④收集足夠的細胞數(shù)來降低變異系數(shù);⑤采用標...[繼續(xù)閱讀]

    分型標本可用EDTAK2或K3或不含防腐劑肝素抗凝后的外周血或骨髓。不同抗凝劑的選擇視實驗不同需要而定。如肝素抗凝的標本適宜用來做遺傳學分析,而用EDTA抗凝的標本則可保持細胞較好的形態(tài)。胸水或腦積液等標本無須抗凝。對于...[繼續(xù)閱讀]

    (一)急性白血病免疫分型單標記抗體的選擇用流式細胞儀檢測常用的單克隆抗體均為異硫氰酸熒光素(FITC)、藻紅蛋白(PE)及PerCP標記的直標抗體。B淋巴系統(tǒng)單抗有CD10、CD19、CD20、CD22等;T淋巴系統(tǒng)單抗有CD2、CD3、CD5、CD7等;粒細胞系統(tǒng)...[繼續(xù)閱讀]

    (一)細胞表面抗原檢測的染色方案(1)取20單克隆抗體與100μl抗凝血,共同混合置室溫20min;(2)加溶血素1500μl,置室溫避光15min,2500r/min離心5min;(3)棄上清,加1500μlPBS,混勻,2500r/min離心5min;(4)同上操作1次,上儀器檢測:以CD45-PerCP/SSC設門,觀察每群...[繼續(xù)閱讀]

    標本經CD45熒光單抗標記后,在SSC與CD45圖中可將白細胞與血小板及紅細胞碎片相區(qū)分,此時就可設門選定細胞分析。在分析表達很弱的抗原(如CD34)時,為了獲得一個準確的結果,對CD45陽性細胞數(shù)目是有要求的。然而對CD45陽性細胞的具體數(shù)...[繼續(xù)閱讀]

    用流式細胞術進行白血病免疫分型,其抗體組合的多少要根據(jù)分析目的和對疾病所表達的特異性標記來確定。如果檢測的目的僅為得出論斷結論,則只需要選用急性淋巴細胞白血病或與慢性淋巴細胞白血病相關特異性抗體組合便可診斷...[繼續(xù)閱讀]

    (1)如檢測標本內混有正常細胞和異常細胞,結果解釋需結合臨床指征和細胞形態(tài)學檢測。在報告細胞標志物結果時,應考慮到有許多免疫標志物并非有嚴格的細胞系別特異性。如CD7雖是T細胞系的標志物,但它也能在一部分的AML病例中表...[繼續(xù)閱讀]

    白血病微小殘留病(minimalresidualdiseases,MRD),是指在白血病經誘導化療獲完全緩解后或是骨髓移植治療后,體內仍殘留有少量白血病細胞的狀態(tài)。用一般形態(tài)學的方法已難以檢出白血病細胞的存在。這些殘存的細胞可能成為白血病復發(fā)的...[繼續(xù)閱讀]

    傳統(tǒng)的流式細胞分析方法僅提供了關于細胞表達抗原頻率的信息,通過檢測多個細胞,可以很容易地計算不同細胞群的含量,通常報告設門內的陽性或陰性細胞的百分含量。如使用已知體積和含量的參考微球,還可以報告細胞絕對計數(shù)和...[繼續(xù)閱讀]