人5-脂氧合酶重組蛋白的純化及其多克隆抗體的制備

摘要： 目的：原核表達(dá)并純化人5-脂氧合酶(5LO)△112蛋白，將其免疫新西蘭大白兔制備5-LO多克隆抗體。方法：使用DNAMAN設(shè)計(jì)重組引物，PCR擴(kuò)增N端缺失112個(gè)氨基酸的5-LO截短DNA片段，將其重組到KpnⅠ和EcoRⅠ酶切的pET30a(+)質(zhì)粒中，重組質(zhì)粒pET30a-5LO△112轉(zhuǎn)化大腸桿菌Rosetta(DE3),培養(yǎng)至OD_(600)為0.4時(shí)加入IPTG以誘...