CRISPR/Cas9介導(dǎo)下UPS系統(tǒng)-E3泛素連接酶ITCH基因敲除細胞株的初步構(gòu)建

摘要： 目的：構(gòu)建CRISPR/Cas9介導(dǎo)下泛素-蛋白酶體系統(tǒng)（ubiquitin proteasome system,UPS）-E3泛素連接酶（atrophin 1interacting protein 4,ITCH）基因敲除細胞株。方法：在人ITCH基因的PAS結(jié)構(gòu)域內(nèi)設(shè)計3個sgRNA，構(gòu)建3個分別同時表達ITCH-sgRNA、Cas9和eGFP的三合一質(zhì)粒。經(jīng)測序序列正確的重...