應(yīng)用CRISPR/Cas9技術(shù)構(gòu)建內(nèi)源表達(dá)雙標(biāo)簽NPM1融合蛋白的細(xì)胞系
解剖科學(xué)進(jìn)展
頁數(shù): 5 2023-05-20
摘要: 目的 旨在創(chuàng)建一個(gè)內(nèi)源表達(dá)NPM-Stag-Flag融合蛋白的細(xì)胞模型,為精確分離和鑒定未知NPM1互作蛋白奠定基礎(chǔ)。方法 結(jié)合CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)并利用同源重組機(jī)制在內(nèi)源NPM1基因位點(diǎn)敲入編碼Stag-Flag的序列,通過藥物篩選分離和鑒定單克隆細(xì)胞。結(jié)果 成功建立了兩種純合型敲入Stag-Flag的人T淋巴瘤JurkatE6-1細(xì)胞系。在C-端插入Stag-...