活化型及失活型n-Src真核表達(dá)載體的構(gòu)建及活性鑒定

摘要： 目的 構(gòu)建神經(jīng)型酪氨酸蛋白激酶n-Src的活化型(aSrc,SrcY535F)及失活型(iSrc,SrcK303R)真核表達(dá)載體并鑒定其在HEK293T細(xì)胞中的表達(dá)及活性。方法 以野生型pRc/CMV-n-Src真核表達(dá)載體為模板,采用PCR定點突變技術(shù)分別擴(kuò)增活化型及失活型pRc/CMV-n-Src全長序列,并轉(zhuǎn)染入HEK293T細(xì)胞,通過免疫印跡檢測n-Src的蛋白表達(dá)及其...