基于Golden Gate高效構(gòu)建psiCHECK雙熒光素酶報告基因的方法及應(yīng)用

摘要： 目的 基于Golden Gate技術(shù)構(gòu)建psiCHECK-CcdB重組雙熒光素酶報告載體，并探討其能否用于RNA干擾（RNA interference, RNAi）藥物篩選。方法 通過聚合酶鏈反應(yīng)（polymerase chain reaction,PCR）擴增CcdB致死基因、氯霉素基因與Golden Gate組裝所需的BsmBI酶切位點，將其克隆至psiCHECK-2載體，...