靶向小鼠CREPT基因CRISPR/Cas9敲除質(zhì)粒的構(gòu)建

摘要： 目的 利用規(guī)律間隔成簇短回文重復(fù)序列/相關(guān)蛋白9(CRISPR/Cas9)系統(tǒng)構(gòu)建靶向小鼠CREPT基因的敲除質(zhì)粒。方法 根據(jù)CRISPR/Cas9靶點設(shè)計原則靶向小鼠CREPT基因的sgRNAs,與體外轉(zhuǎn)錄載體pUC57-sgRNA連接，構(gòu)建CREPT基因敲除質(zhì)粒；體外切割實驗驗證設(shè)計的sgRNAs是否具有活性。結(jié)果 設(shè)計了3條sgRNAs并分別準(zhǔn)確插入pUC57-sgRNA...