miRNA加工途徑的功能性鑒定方法

摘要： 目的 構(gòu)建新型慢病毒載體，以尋求最佳的miRNA加工途徑功能性鑒定方法。方法 通過一種雙功能慢病毒載體同時(shí)表達(dá)報(bào)告分子綠色熒光蛋白(GFP)以及GFP特異性miRNA初級(jí)轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物(pri-miRNA);后者利用內(nèi)源性miRNA加工途徑形成GFP特異性成熟miRNA,進(jìn)而干擾報(bào)告分子GFP的表達(dá)，通過GFP的表達(dá)水平監(jiān)控miRNA加工途徑。結(jié)果 在腫瘤細(xì)胞系和皮膚原代細(xì)胞中驗(yàn)證了...