重組人降鈣素原的制備及發(fā)酵優(yōu)化

摘要： 目的 制備人降鈣素原(PCT)蛋白，用于抗體制備及檢測試劑盒的研制。方法 通過分子克隆技術(shù)構(gòu)建人PCT重組表達(dá)質(zhì)粒(pET28a-PCT),以大腸桿菌BL21(DE3)為宿主細(xì)胞，進(jìn)行PCT的原核表達(dá)，利用發(fā)酵罐進(jìn)行大腸桿菌的高密度培養(yǎng)并優(yōu)化發(fā)酵條件，鎳柱純化重組蛋白。標(biāo)定重組蛋白水平后，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)驗證重組蛋白作為標(biāo)準(zhǔn)蛋白在繪制水平-吸光度標(biāo)準(zhǔn)曲線中的應(yīng)...