一、基本原理由一條RNA單鏈轉(zhuǎn)錄為互補(bǔ)DNA(cDNA)稱(chēng)作“逆轉(zhuǎn)錄”,由依賴(lài)RNA的DNA聚合酶(逆轉(zhuǎn)錄酶)來(lái)完成。隨后,DNA的另一條鏈通過(guò)脫氧核苷酸引物和依賴(lài)DNA的DNA聚合酶完成,隨每個(gè)循環(huán)倍增,即通常的PCR。原先的RNA模板被RNA酶H降解,留下互...[繼續(xù)閱讀]

    一、基本原理常規(guī)PCR是對(duì)終產(chǎn)物進(jìn)行定量和定性分析,而定量PCR(quantitative PCR,QPCR)是對(duì)擴(kuò)增反應(yīng)中每一個(gè)循環(huán)的產(chǎn)物進(jìn)行定量和定性分析。廣義概念的QPCR技術(shù)是指以外參或內(nèi)參為標(biāo)準(zhǔn),通過(guò)對(duì)PCR終產(chǎn)物的分析或PCR過(guò)程的監(jiān)測(cè),進(jìn)行PCR起...[繼續(xù)閱讀]

    一、基本原理DNA甲基化是指CpG二核苷酸中的胞嘧啶第5位碳原子被甲基化。DNA甲基化是一種基因外修飾,不改變DNA的一級(jí)結(jié)構(gòu);它在細(xì)胞正常發(fā)育、基因表達(dá)模式以及基因組穩(wěn)定性中起著至關(guān)重要的作用。全基因組低甲基化,維持甲基化...[繼續(xù)閱讀]

    一、目的和要求1. 掌握從牛奶中分離酪蛋白的基本原理和操作方法。2. 了解蛋白質(zhì)等電點(diǎn)的性質(zhì)和應(yīng)用。二、基本原理牛奶中含豐富的蛋白質(zhì),其中主要是酪蛋白。蛋白質(zhì)在其等電點(diǎn)pI溶液中溶解度最低。據(jù)此原理,將牛奶的pH調(diào)至4...[繼續(xù)閱讀]

    蛋白質(zhì)的定量分析是生物化學(xué)和其他生命學(xué)科最常涉及的分析內(nèi)容。蛋白質(zhì)測(cè)定的方法很多(見(jiàn)表10-1),需要在了解各種方法的基礎(chǔ)上根據(jù)不同情況選用恰當(dāng)?shù)姆椒?以滿(mǎn)足不同的要求。下面介紹Folin-酚試劑法、紫外分光光度法、考馬斯...[繼續(xù)閱讀]

    蛋白質(zhì)是兩性電解質(zhì)。在pH值小于其等電點(diǎn)的溶液中,蛋白質(zhì)帶正電荷,在電場(chǎng)中向陰極移動(dòng);在pH值大于其等電點(diǎn)的溶液中,蛋白質(zhì)帶負(fù)電荷,在電場(chǎng)中向陽(yáng)極移動(dòng)。血清中含有數(shù)種蛋白質(zhì),它們所具有的可解離基團(tuán)不同,在同一pH的溶液中...[繼續(xù)閱讀]

    一、目的和要求1. 掌握SDS-PAGE測(cè)定蛋白質(zhì)分子量的原理。2. 了解垂直板電泳的操作方法。二、基本原理SDS-聚丙烯酰胺凝膠(SDS-PAGE)電泳,是在聚丙烯酰胺凝膠系統(tǒng)中引進(jìn)十二烷基磺酸鈉(SDS)。SDS能斷裂分子內(nèi)和分子間氫鍵,破壞蛋白質(zhì)的...[繼續(xù)閱讀]

    一、目的和要求1. 了解離子交換層析的工作原理及操作技術(shù)。2. 學(xué)會(huì)用離子交換層析法分離混合氨基酸。二、基本原理離子交換層析是利用離子交換劑上的可交換離子與周?chē)橘|(zhì)中被分離的各種離子間親和力的不同,經(jīng)過(guò)交換平衡達(dá)...[繼續(xù)閱讀]

    一、目的和要求1. 掌握從人外周血中提取、分離和純化基因組DNA的基本原理和操作方法。2. 了解人體基因組DNA的特點(diǎn)與用途。二、基本原理人基因組由30億對(duì)堿基組成,它包括單倍體細(xì)胞中的全部基因?；虿粌H可以通過(guò)復(fù)制把遺傳...[繼續(xù)閱讀]

    一、目的和要求1. 掌握從動(dòng)物中提取、分離和純化RNA的基本原理和操作方法。2. 了解RNA的生物學(xué)特性及其在研究中的應(yīng)用。二、基本原理細(xì)胞內(nèi)大部分RNA均與蛋白質(zhì)結(jié)合在一起,以核蛋白的形式存在。因此分離RNA時(shí)必須使RNA與蛋白質(zhì)...[繼續(xù)閱讀]